一名优秀的教师在教学时都会提前最好准备，作为教师就要在上课前做好适合自己的教案。教案可以让学生更好地进入课堂环境中来，帮助教师能够井然有序的进行教学。教案的内容要写些什么更好呢？急您所急，小编为朋友们了收集和编辑了“《微生物的实验室培养》教学设计”，欢迎阅读，希望您能够喜欢并分享！

《微生物的实验室培养》教学设计课题名称课时数说明微生物的实验室培养4配养基的基本知识及配制方法1；配制培养基及倒平板1；纯化大肠杆菌和涂布接种1，观察分析1分离土壤中分解尿素的细菌3基本原理及实验设计1；样品稀释及涂布接种1；对菌落进行统计及实验的分析与讨论1；在第二和第三课时之间需要间隔2天时间分解纤维素的微生物的分离3基本原理及实验设计1；样品稀释及涂布接种1；对菌落进行统计及实验的分析与讨论1；在第二和第三课时之间需要间隔2天时间
提前准备好实验仪器、设备和药品
课题名称实验仪器和设备实验试剂或药品说明微生物的实验室培养培养皿、试管、锥形瓶、量筒、酒精灯、电子天秤、高压蒸汽灭菌锅、移液管、接种环、涂布器、恒温箱、干热灭菌箱、小铁铲等
牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、盐酸、氢氧化钠、琼脂等干热灭菌箱能够迅速地将洗干净的培养皿和试管烘干，小铁铲用于铲土土壤中分解尿素的细菌的分离与计数除配制牛肉膏蛋白胨培养基所需物质外，增加KH2PO4、NaHPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、酚红等分解纤维素的微生物的分离除配制牛肉膏蛋白胨培养基所需物质外，增加纤维素、NaNO3、Na2HPO47H2O、KH2PO4、KCl、酵母膏、水解酪素、CMC-Na(羧甲基纤维素钠)、土豆汁、刚果红等安排好教学班的实验顺序
微生物实验涉及较多的实验仪器，而且实验时需要课内和课外相结合，如实验室培养需要学生在课堂上完成两项重要的操作步骤，一是配制培养基并倒平板；二是接种操作。平板灭菌工作由于需要较长的时间，因此只能由教师在课间完成。为保证每位学生都能亲手操作，保证各个教学班能在有限时间内完成实验任务，教师要合理安排好教学班的实验顺序。
做好课后的观察与记录
配制培养基和接种操作可以在课堂上完成，但接种后的平板放入培养箱中需要培养2～3天，这期间可安排生物科代表或部分小组长进行定期观察，并做好计录，以便及时让其他学生观察到自己的实验成果。特别需要说明的是，如果学生不能及时观察，培养的时间过长，很多菌落就会联成一片，计数时就无法做到准确有效。
微生物的培养教学设计
教学目标：
（一）知识目标网]
了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术
（二）能力目标
分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象
（三）情感目标
形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神
教学重点：无菌技术的操作
教学难点：无菌技术的操作
教学过程：
（一）导入
美媒：中国尝试用细菌吃掉大连港漏油
2010年7月29日新闻：上周中国北方大连港两根输油管发生爆炸后，北京一家生物科技公司提供了23吨吃油细菌，用于帮助清理港口周围183平方公里的浮油，此举引起了广泛关注。
微生物作画1微生物作画2
（二）具体过程
知识背景：
1培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
思考1：琼脂的化学成分是什么？在配制培养基中时的作用是？
培养基的类型及其应用：
标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离,鉴定,计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保存液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成合成培养基由已知成分配制而成，培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明确工业生，产降低成本目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加（或缺少）某种化学成分菌种的分离
2培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。
思考2：从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？
碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
3培养基除满足微生物生长的pH、特殊营养物质和氧气等要求。
思考3：牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么营养物质？
思考4：培养乳酸杆菌时需要添加什么物质？
培养霉菌和细菌时分别需要怎样调节pH？
生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
阅读无菌技术，讨论回答下列问题：
4获得纯净培养物的关键是什么？
5无菌技术包括哪些？
6比较消毒和灭菌（填表）
比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能
思考5：无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是？
7消毒方法：
（1）日常生活经常用到的是煮沸消毒法；
（2）对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法（作简要介绍）；（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶
液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒。
（4）实验操作者的双手使用酒精进行消毒；
（5）饮水水源用氯气进行消毒。
8灭菌方法：
（1）接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；
（2）玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭
菌箱；
（3）培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸
汽灭菌锅。
（4）表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外
灯。
思考6：对接种环灭菌时要用酒精灯的哪一个层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部位？
思考7：利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的
是什么？
思考8：物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是？
培养基的配制原则：
①目的要明确
②营养要协调
③pH要适宜
实验操作
思考1：锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？
思考2：倒平板的目的是？
思考3：若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？
思考4：配制斜面培养基中，试管要加塞棉塞的目的是？
思考5试管培养基形成斜面的作用是？
补充取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。
在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。
稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
系列稀释操作：
①取盛有9mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次，使之混匀。
③从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。
结果分析与评价
1．培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。
2．在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。
3．培养12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）；菌落分布位置相同（相同、不同）。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。
思考1：在某培养基上出现了3种特征不同的菌落，原因有哪些？
思考2：频繁使用的菌种利用临时保藏法保存，长期保存菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培养基培养后，保存在4℃冰箱中，每3～6个月转种培养一次，缺点是什么？后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在多少度冷冻箱中？
（三）课堂总结、点评
课后探究
１、收集生活中与微生物有关的实例，并通过所学知识对其进行
解释
２、我们打针输液时，首先要用酒精擦拭针刺处，为什么？

精选阅读

微生物的实验室培养导学案及练习题

一名优秀的教师在教学方面无论做什么事都有计划和准备，作为高中教师就要好好准备好一份教案课件。教案可以让学生更容易听懂所讲的内容，帮助高中教师能够井然有序的进行教学。那么，你知道高中教案要怎么写呢？下面是小编精心为您整理的“微生物的实验室培养导学案及练习题”，仅供参考，大家一起来看看吧。

一、学习目标：
1.了解有关培养基的基础知识
2.掌握无菌操作技术
3.了解纯化大肠杆菌的基础知识
二、学习重点、难点：
了解有关培养基的基础知识；掌握无菌操作技术
三、学法指导：小组交流合作一对一检查通关
四、自主学习
一基础知识
1.培养基
（1）培养基的种类包括培养基和培养基等。
（2）培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分，
（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件
2.无菌技术
（1）获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：
①
②
③
④
（2）消毒是指
灭菌是指
（3）实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。
二实验操作
1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：
→→→→倒平板
（2）倒平板的过程

⑴培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的温度？

⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？

⑷在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？

2.纯化大肠杆菌
（1）微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指
。
稀释涂布平板法是指
。
（2）平板划线的操作步骤如下：
①
②
③
④
⑤
⑥
⑦

①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？

②在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？

③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？

（3）系列稀释操作步骤：
①
②
③
（4）涂布平板操作步骤：
①
②
③
④

选修一生物2.1微生物的实验室培养学案（人教版）

俗话说，居安思危，思则有备，有备无患。教师在教学前就要准备好教案，做好充分的准备。教案可以让学生们能够更好的找到学习的乐趣，减轻教师们在教学时的教学压力。教案的内容具体要怎样写呢？为此，小编从网络上为大家精心整理了《选修一生物2.1微生物的实验室培养学案（人教版）》，仅供您在工作和学习中参考。

课题1　微生物的实验室培养
问题导学
一、培养基和无菌技术
活动与探究1
1．配制培养基所用的琼脂的成分和作用是什么？
2．为什么有的微生物培养基中需加入特殊营养物质？
3．培养基是如何分类的？
4．消毒和灭菌的原理、实质相同吗？
5．请判断以下材料或用具是需要消毒还是灭菌。
（1）培养细菌用的培养基与培养皿。
（2）玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。
（3）实验操作者的双手。
迁移与应用1
灭菌的标准是（）。
A．杀死所有的病原微生物
B．杀死物体表面所有的微生物
C．杀死所有的微生物，包括芽孢和孢子
D．使病原菌不生长
1．培养基的类型及应用
标准培养基类型配制特点主要应用
物
理
性
质固体培养基加入琼脂较多菌种分离，
鉴定，计数
半固体培养基加入琼脂较少菌种保藏
液体培养基不加入琼脂工业生产，
连续培养
化
学
成
分天然培养基含化学成分不明
确的天然物质工业生产
合成培养基培养基成分明确分类鉴定
目
的
用
途鉴别培养基添加某种指示剂
或化学药剂菌种的鉴别
选择培养基添加（或缺少）
某种化学成分菌种的分离
注：培养基中的营养物质是维持机体生命活动，保证生殖、发育所需的外源物质。在人和动物中，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物中，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳三类；微生物共有的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源，有些微生物还需要特殊营养物质。
2．实验室常用的消毒或灭菌方法
灭菌或消毒种类主要方法应用范围
灼烧灭菌酒精灯火焰灼烧接种环、接种针及试管口等
干热灭菌干热灭菌箱内，在160～170℃下加热1～2h玻璃器皿、金属用具等
巴氏消毒70～75℃下煮30min牛奶、啤酒等一些不耐高温的液体
高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌锅内，100kPa，121℃下持续加热15～30min培养基等
紫外线消毒30W紫外线灯照射30min接种室空气等
化学药物消毒用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，手术器械、玻璃器皿等消毒
二、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
活动与探究2
1．用流程图表示该培养基的制备过程。
2．如果倒平板过程中，皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？
3．培养基灭菌后，需要冷却至50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
4．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
迁移与应用2
关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，下列叙述错误的是（）。
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5～10分钟后将平板倒过来放置
1．由于不同的微生物生长对pH的需求不同，如培养霉菌时需将培养基调至酸性，培养细菌时需将培养基调至中性或微碱性，所以在培养基各组分溶化后需要先用酸或碱将pH调至微生物生长的最适宜条件，再进行灭菌处理。
2．培养基需要冷却至50℃时才能开始倒平板的原因：琼脂是一种多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板时高于50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。
三、纯化大肠杆菌
活动与探究3
1．纯化大肠杆菌时需要接种，请列举接种的技术并说出它们共同的核心操作。
2．什么叫菌落？如何从“菌落”角度评价平板划线法或稀释涂布平板法的成功性？
3．学习教材第18页平板划线操作，思考下列问题。
（1）为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？
（2）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
（3）平板划线时不能划破培养基的原因是什么？
4．学习教材第19页稀释涂布平板操作，思考下列问题。
（1）稀释涂布平板法的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线法与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第二步应如何进行无菌操作？
（2）操作结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养？
迁移与应用3
下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是（）。
A．只在操作前将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
1．接种方法的比较及分析
（1）平板划线法：操作简单，但是单菌落不易分离。
（2）稀释涂布平板法：操作复杂，但是单菌落易分离。
（3）稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
2．结果评价
如果培养基上生长的菌落在颜色、形状、大小上基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，重新操作。
答案：
课前预习导学

一、1．生长繁殖
2．（1）液体　（2）液体　琼脂　琼脂固体　固体　菌落
3．（1）水　碳源　氮　（2）pH　氧气　维生素　酸性　中性　微碱　无氧
预习交流1：（1）提示：构成细胞的基本元素有C、H、O、N4种，由此推测培养基应含有提供C的物质（碳源）、提供N的物质（氮源）、提供H和O的物质（H2O）。
（2）提示：还有P、S、K、Ca、Mg等，据此推测培养基中应含有提供P、S、K、Ca、Mg等元素的物质（无机盐）。
（3）提示：自养微生物的碳源是含碳的无机物，主要是CO2、NaHCO3等，而异养微生物的碳源则是含碳的有机物，如糖类、脂肪酸等。
二、1．外来杂菌
2．物理　化学　一部分　芽孢　孢子
3．理化因素　内外　芽孢　孢子
4．（1）空间　衣着　手　（2）器皿　接种用具　培养基　（3）酒精灯火焰　（4）灭菌　周围的物品
5．（1）巴氏消毒　（2）灼烧　（3）干热　（4）100　121　15～30　（5）紫外线　化学药物
预习交流2：（1）提示：被褥、鞋袜要常晒；肉制品储存时用盐腌等。
（2）提示：家畜阉割后，要在其伤口涂抹一些酒精或白酒；初冬杨树树干涂刷生石灰水等。
（3）提示：打针时，注射部位要用酒精棉球擦洗；家畜阉割后，要在其伤口处涂抹一些酒精。
三、2．容易吸潮
3．琼脂糊底
4．高压蒸汽　干热
5．50　酒精灯火焰
四、1．平板划线法　稀释涂布平板法
2．一个　子细胞群体
五、临时保藏　甘油管藏
课堂合作探究

活动与探究1：
1．提示：琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基时作为凝固剂。
2．提示：因为有的微生物缺乏合成这些物质所需的酶或合成能力有限。
3．提示：按物理性质分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基；按化学成分分为天然培养基和合成培养基；按用途分为选择培养基和鉴别培养基。
4．提示：原理相同，都是使微生物的蛋白质变性，借此杀死微生物；实质不同，灭菌可杀死物体内外的全部微生物（包括芽孢和孢子），而消毒仅杀死部分微生物。
5．提示：（1）（2）需要灭菌，（3）需要消毒。
迁移与应用1：C　解析：灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
活动与探究2：
1．提示：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
2．提示：不能。空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基，因此，最好不要用这种平板培养微生物。
3．提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
4．提示：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。
迁移与应用2：A　解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。待培养基冷却至50℃左右，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时进行倒平板。平板冷却几分钟后还需倒置。
活动与探究3：
1．提示：菌种的接种技术包括平板划线操作、稀释涂布平板操作、斜面接种、穿刺接种等，它们共同的核心操作是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
2．提示：在培养基上由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体叫菌落。平板划线法或稀释涂布平板法如能在培养基上得到单个的菌落就是成功的。
3．（1）提示：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落。划线结束后需要灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者。
（2）提示：以免接种环温度太高杀死菌种。
（3）提示：一是划破培养基会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；二是即使在划破处有单个细胞，也无法形成规则的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。
4．（1）提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适，吸管头不要接触任何其他物体，吸管要在酒精灯火焰周围等。
（2）提示：培养未接种培养基的作用是对照，未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的。若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底，或培养基被污染了，需要重新制备。
迁移与应用3：D　解析：操作前后都要对接种环进行灭菌；划线操作须在火焰旁进行，而不是火焰上；所有的划线区都有可能得到所需菌落。
当堂检测
1．某培养基的配方表如下，下列叙述正确的是（）。
成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水
含量10g10g2g0.4g0.065g定容至1000mL
A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基
B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨
C．该培养基缺少提供生长因子的物质
D．培养基调节好pH后就可以接种菌种
答案：B　解析：此配方中，葡萄糖主要作碳源，蛋白胨作氮源，同时还可提供生长因子。从用途看该培养基为鉴别培养基。在调节好pH后还需灭菌，然后才可用于菌种的培养。
2．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。但一般都需要水、碳源、氮源和无机盐。下列有关微生物所需营养物质的描述中，正确的是（）。
A．氮源物质只能为该微生物提供必要的氮元素
B．有些碳源也可以给微生物的生长提供能源
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质，所以无机盐越多越好
D．固体培养基中不含水分
答案：B　解析：含氮的有机物既可给微生物提供氮元素，也可给微生物提供能源；含碳的有机物既可给微生物提供碳元素，也可给微生物提供能源。微生物生长需要无机盐，但不是越多越好，过多会导致培养基渗透压过高，使微生物因失水过多而不能生存。固体培养基中也含有水分，因为含有凝固剂琼脂，所以呈固态。
3．关于灭菌和消毒的理解不正确的是（）。
A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子
B．消毒和灭菌实质上是完全相同的
C．接种环用灼烧法灭菌
D．常用灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法
答案：B　解析：消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
4．下列有关平板划线操作的说法正确的是（）。
A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞
C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养
答案：D　解析：使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中对接种环也要灭菌；含菌种的试管在打开后和塞棉塞前都要通过酒精灯火焰灭菌；要分区域多次划线，第二次划线要从第一次划线的末端开始。
5．产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）。
A．一个细菌，液体培养基
B．许多细菌，液体培养基
C．一个细菌，固体培养基
D．许多细菌，固体培养基
答案：C　解析：菌落是由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，因此标准菌落应来源于最初的一个细菌。产生菌落的培养基不可能是液体培养基。
绘制牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备及大肠杆菌纯化的流程图。

《微生物的培养与应用》学案

《微生物的培养与应用》学案

生物选修一第二章微生物的培养与应用教案
★课题目标
（一）知识与技能
了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术
（二）过程与方法
分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象
（三）情感、态度与价值观
形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神
★课题重点
无菌技术的操作
★课题难点
无菌技术的操作
★教学方法
启发式教学
★教学工具
多媒体课件
★教学过程
（一）引入新课
在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
（二）进行新课
1．基础知识
1．1培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。
培养基的类型及其应用：

1．2培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。
〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？
C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。
碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
1．3培养基除满足微生物生长的pH、特殊营养物质和氧气等要求。
生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：
1．4获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。
1．5无菌技术包括：
（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；
（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；
（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；
（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
1．6比较消毒和灭菌（填表）

〖思考5〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是防止感染实验操作者。
1．7消毒方法：
（1）日常生活经常用到的是煮沸消毒法；
（2）对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法（作简要介绍）；
（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒。
（4）实验操作者的双手使用酒精进行消毒；
（5）饮水水源用氯气进行消毒。
1．8灭菌方法：
（1）接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；
（2）玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；
（3）培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。
（4）表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。
〖思考6〗对接种环灭菌时要用酒精灯的充分燃烧层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部位。
〖思考7〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是避免妨碍热空气流通。
〖思考8〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是有利于锅内温度升高；随后关闭排气阀继续加热，气压升至100kPa，温度为121℃，并维持15～30min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至零时打开锅盖，其目的是防止容器中的液体暴沸。
培养基的配制原则：
①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。
②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。
③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。
2．实验操作
2．1计算：根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。
2．2称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
2．3溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯化钠继续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到100mL。整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
2．4调pH：用1mol/LNaOH溶液调节pH至偏碱性。
2．5灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。
2．6倒平板：待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是：
①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；
②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；
③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。
④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。
〖思考1〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是消灭瓶口的杂菌，防止杂菌感染培养基。
〖思考2〗倒平板的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。
〖思考3〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？
不能。空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。
〖思考4〗配制斜面培养基中，试管要加塞棉塞的目的是保持通气并防止杂菌感染。
〖思考5〗试管培养基形成斜面的作用是增大接种面积。
2．7接种
2．7．1微生物接种的最常用方法是平板划线法和稀释涂布法，另外还有穿刺接种和斜面接种等。
2．7．2平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。其操作步骤是：
①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。
④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。
⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。
⑧将平板倒置放在培养箱中培养。
〖思考6〗取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。
〖思考7〗在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。
2．7．3　稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
2．7．4　系列稀释操作：
①取盛有9mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次，使之混匀。
③从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。
〖思考8〗操作中试管口和移液管应在离火焰1～2cm处。整个操作过程中使用了1支移液管。
3．结果分析与评价
3．1　培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。
3．2　在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。
3．3　培养12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）；菌落分布位置相同（相同、不同）。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。
〖思考9〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落，原因有培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。
〖思考10〗频繁使用的菌种利用临时保藏法保存，长期保存菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培养基培养后，保存在4℃冰箱中，每3～6个月转种培养一次，缺点是保存时间较短，容易发生污染和变异；后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在－20℃冷冻箱中。
（三）课堂总结、点评
（四）实例探究
例1．关微生物营养物质的叙述中，正确的是
A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量
C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量
解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；NaHCO3，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。
答案：D
例2．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是
A.防止杂菌污染B.消灭杂菌
C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前
解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。C是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。
答案：B
☆综合应用
例3．右表是某微生物培养基成分，请据此回答：
编号成分含量
①粉状硫10g
②（NH4）2SO40.4g
③K2HPO44.0g
④MgSO49.25g
⑤FeSO40.5g
⑥CaCl20.5g
⑦H2O100ml
（1）右表培养基可培养的微生物类型
是。
（2）若不慎将过量NaCl加入培养基中。
如不想浪费此培养基，可再加入，
用于培养。
（3）若除去成分②，加入（CH2O），该培
养基可用于培养。
（4）表中营养成分共有类。
（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化
后分装前，要进行的是。
（6）右表中各成分重量确定的原则是。
（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是。
解析：对于一个培养基，它能培养何种微生物，要看它的化学成分。当然这只适用于合成培养基，如果是一个天然培养基就不能从培养基的成分上区分它是培养何种微生物的。分析化学成分要从营养物质的类型出发。右表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。对特殊营养物质，有的微生物是不需要的，但没有微生物是不需要碳源的。该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可培养的微生物就是自养型微生物了。该培养基中加入了过量食盐，就可以成为金黄色葡萄球菌鉴别培养基，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培养基就还需要加入有机碳源。该培养基若加入（CH2O），培养基中就有了碳源，但除去成分②，却使培养基中没有了氮源，这时就只能用于培养固氮微生物了。对于菌种鉴定，往往用的是固体培养基，而表中没有凝固剂，需要加入常见的凝固剂——琼脂。
答案：⑴自养型微生物⑵含碳有机物金黄色葡萄球菌⑶固氮微生物⑷3⑸调整pH⑹依微生物的生长需要确定⑺琼脂（或凝固剂）
（五）巩固练习
1．不可能作为异养微生物碳源的是
A．牛肉膏B．含碳有机物C．石油D．含碳无机物
2．根瘤菌能利用的营养物质的组别是
A．NH3，（CH2O），NaClB．N2，（CH2O），CaCl2
C．铵盐，CO2，NaClD．NO2，CO2，CaCl2
3．配制培养基的叙述中正确的是
A．制作固体培养基必须加入琼脂B．加入青霉素可得到放线菌
C．培养自生固氮菌不需氮源D．发酵工程一般用半固体培养基
4．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是
A．碳源B．氮源C．无机盐D．特殊营养物质
5．下表是有关4种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的概述。其中正确的是()
生物硝化细菌根瘤菌酵母菌谷氨酸棒状杆菌
能源氧化NH3N2的固定分解糖类等有机物光能
碳源C02糖类糖类糖类
氮源NH3N2NH4+、NO3-尿素
代谢类型自养需氧型异养需氧型异养兼性厌氧型自养需氧型
A．根瘤菌、谷氨酸棒状杆菌B．硝化细菌、酵母菌
C．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌D．硝化细菌、根瘤菌
6．甲、乙、丙是三种微生物，下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ种正常生长繁殖；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（）
粉状硫
10gK2HPO4
4gFeSO4
0.5g蔗糖
10g（NH4）2SO4
0.4gH2O
100mlMgSO4
9.25gCaCl2
0.5g
Ⅰ++++-+++
Ⅱ+++-++++
Ⅲ++++++++
A、甲、乙、丙都是异养微生物
B、甲、乙、丙都是自养微生物、丙是异养微生物
C、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物
D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物
7．微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是
A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B．微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子
C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利
D．生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的能力往往不足。
8．某一种细菌株要从环境中提取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型。根据实验年目的，选用的培养基类型是（）
　注：Ｌ—亮氨酸Ｓ—链霉素“＋”—加入“—”—不加入
　如：Ｌ—：不加亮氨酸Ｓ＋：加入链霉素
选项筛选出不需要亮氨酸的菌株筛选出抗链霉素的菌株筛选出不需要亮氨酸的抗链霉素的菌株
ＡＬ＋Ｓ＋Ｌ—Ｓ—Ｌ＋Ｓ－
ＢＬ－Ｓ—Ｌ＋Ｓ＋Ｌ—Ｓ＋
ＣＬ—Ｓ＋Ｌ＋Ｓ＋Ｌ—Ｓ—
ＤＬ＋Ｓ—ｌ—Ｓ—Ｌ＋Ｓ＋
9．要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他的细菌分离出来，应将它们接种在
A．加入氮源和杀菌剂的培养基上B．不加入氮源和不加杀菌剂的培养基上
C．加入氮源，不加杀菌剂的培养基上D．不含氮源和杀菌剂的培养基上
10．酵母菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，原因是
A．碳源供应太充足B．细胞会发生质壁分离
C．改变了酵母菌的pH值D．葡萄糖不是酵母菌的原料
答案：DACACCDBBB
★课余作业
１、收集生活中与微生物有关的实例，并通过所学知识对其进行解释
２、我们打针输液时，首先要用酒精擦拭针刺处，为什么？
★教学体会
本节课可以通过生产实例导入，使学生认识在微生物的培养过程中，保持培养物纯净的重要性。在课堂上可以跳出教材，充分发挥学生的主动性，让学生收集列举更多的生产生活中的实例，从中体会培养物纯净的重要性。当时由于微生物的微观性和危害性，一定要教育学生培养良好的卫生习惯。
★资料袋
微生物的特点
1.个体微小，结构简单
在形态上，个体微小，肉眼看不见，需用显微镜观察，细胞大小以微米和纳米计量。
2.繁殖快
生长繁殖快，在实验室培养条件下细菌几十分钟至几小时可以繁殖一代。
3.代谢类型多，活性强。
4.分布广泛
有高等生物的地方均有微生物生活，动植物不能生活的极端环境也有微生物存在。
5.数量多
在局部环境中数量众多，如每克土壤含微生物几千万至几亿个。
6.易变异
相对于高等生物而言，较容易发生变异。在所有生物类群中，已知微生物种类的数量仅次于被子植物和昆虫。微生物种内的遗传多样性非常丰富。
所以微生物是很好的研究对象，具有广泛的用途。

微生物的营养

一位优秀的教师不打无准备之仗，会提前做好准备，教师在教学前就要准备好教案，做好充分的准备。教案可以让学生更好地进入课堂环境中来，帮助教师更好的完成实现教学目标。怎么才能让教案写的更加全面呢？以下是小编收集整理的“微生物的营养”，仅供参考，大家一起来看看吧。

选修本
第17课时微生物的营养

一、微生物的营养物质分为、、、和五大类。
（1）碳源——无机碳源如：；有机碳源如：。
（2）氮源——无机氮源如：；有机氮源如：。
（3）生长因子——主要包括、、等。
二、培养基的配制原则：1．2．3．
三、培养基的种类
1．根据物理性质：

种类是否含凝固剂用途
固体培养基
半固体培养基
液体培养基

2．根据化学成分：

种类化学成分是否明确用途
合成培养基
天然培养基

编号成分含量
①粉状硫10.00g
②（NH4）2SO40.40g
③K2HPO44.0g
④MgSO49.25g
⑤FeSO40.50g
⑥CaCl20.50g
⑦H2O100ml

3．根据用途

种类制备方法原理用途实例
选择培养基
鉴定培养基

右表是某微牛物培养液成分。请据此回答：
(1)右表培养基可培养的微生物类型是；
(2)若不慎将过量NaCl加入培养基中，如不想浪费此培养基，可再加入，用于培养；
(3)若除去成分②，加入(CH20)，该培养基可用于培养；
(4)表中营养成分共有类；
(5)不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是；(6)右表中各成分重量确定的原则是；
(7)若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是。
答案：⑴自养微生物⑵含碳有机物金黄色葡萄球菌⑶固氮微生物⑷3⑸调整PH值⑹依微生物的生长需要确定⑺琼脂（或凝固剂）

一、选择题
1．下列物质中，能为根瘤提供碳源、氮源的
　Ａ．大豆粉和蛋白　Ｂ．CO2和N2　Ｃ．葡萄糖和N2Ｄ．碳酸盐和NH3
2．下列关于生长因子的叙述不正确的是
　Ａ．生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物
　Ｂ．一般是酶、核酸的组成部分
　Ｃ．自身不能合成，必须由外界补充
　Ｄ．主要包括维生素、氨基酸和碱基等
3．对下列培养基的叙述正确的是
　Ａ．制作固体培养基必须加入琼脂　Ｂ．加入青霉素可得到放线菌
　Ｃ．培养自生固氮菌不需氮源　Ｄ．发酵工程一般用半固体培养基
4．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用
　Ａ．固体培养基　Ｂ．液体培养基
　Ｃ．加入青霉素的培养基　Ｄ．加入高浓度食盐的培养基
二、非选择题
5．下表是一种培养基的配方。请回答:

牛肉膏0.5g
蛋白胨1g
NaCl0.5g
琼脂2g
水200mL

（1）此培养基的营养要素有类,其中蛋白胨能提供的是。
（2）各成分重量确定的原则是。
（3）在各种成分溶化后分装前，须进行的是。
（4）该培养基依物理性质划分属于培养基，能培养的细菌代谢类型是。
（5）如要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标，需加入。观察它的。
（6）此培养基能否用于培养产生人的生长激素的工程菌？。原因是。
（7）若有几种杂菌混合在一起，可采用什么方法将它们分离？。若细菌中混杂有酵母菌，要将酵母菌分离出来，可采用。

自我评价答案
1C2C3C4A5（1）五碳源、氮源、生长因子、能源（2）根据所培养微生物的营养需要（3）调节PH值（4）固体异养型（5）伊红——美蓝菌落（6）不能工业生产常使用液体培养基（7）在固体培养基上用划线法或稀释后用点接法在选择培养基中加入青霉素

文章来源：http://m.jab88.com/j/47384.html

更多